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畢赤酵母宿主蛋白酶聯(lián)檢測試劑盒是用來定量分析以畢赤酵母為表達細胞的生物藥物中宿主蛋白雜質(zhì)的試劑盒。首先，用不同濃度的畢赤酵母標(biāo)準蛋白制作一條標(biāo)準曲線，然后再根據(jù)標(biāo)準曲線來分析生物藥物宿主細胞殘留蛋白的含量。具體方法為：先將畢赤酵母標(biāo)準蛋白或者待測樣品適當(dāng)稀釋后加入已包被好

抗畢赤酵母宿主蛋白抗體的96孔平板中。經(jīng)過1.5小時的保溫，宿主細胞蛋白與已經(jīng)固定在平板上的抗體結(jié)合形成抗原－抗體復(fù)合物。此復(fù)合物被隨后加入的生物素標(biāo)記的抗畢赤酵母宿主蛋白的抗體結(jié)合并進一步形成更高級的復(fù)合物，反應(yīng)45分鐘后洗去未結(jié)合的物質(zhì)。再加入鏈霉親合素-辣根過氧化物酶復(fù)合物，靜置30分鐘。因鏈霉親合素可以與任何帶生物素標(biāo)記的抗體相結(jié)合，從而使鏈霉親合素-辣根過氧化物酶復(fù)合物連接到平板上。接下來沖洗掉未結(jié)合的物質(zhì)，加入TMB底物。固相上的酶催化底物產(chǎn)生顏色反應(yīng)，待顏色反應(yīng)一段時間后，終止反應(yīng)。用酶標(biāo)儀在450 nm波長下測定其結(jié)果，此結(jié)果能間接地反應(yīng)結(jié)合到平板上的的宿主細胞蛋白數(shù)量的多少。根據(jù)畢赤酵母宿主蛋白標(biāo)準曲定量分析生物藥物中宿主細胞殘留蛋白的含量。