在細胞培養(yǎng)中遇到培養(yǎng)液pH值變化太快，怎么辦-上海睿玥實驗器材有限公司

細胞培養(yǎng)是指在體外模擬體內(nèi)環(huán)境（無菌、適宜溫度、酸堿度和一定營養(yǎng)條件等），使之生存、生長、繁殖并維持主要結(jié)構(gòu)和功能的一種方法。細胞培養(yǎng)看重的就是無菌操作，無菌操作是細胞培養(yǎng)是否成功的關(guān)鍵點。凡是放入超凈臺中的不是一次性使用的物品事先都需要經(jīng)過高壓滅菌；不能進行高壓處理的物品也需要經(jīng)過75%的乙醇消毒。包括酒精燈、吸管、移液器、試管架、培養(yǎng)皿、廢液缸等。

培養(yǎng)液pH值變化太快，怎么辦？

可能造成的原因：

1.CO2張力不對；

2.培養(yǎng)瓶蓋擰得太緊；

3.NaHCO3 緩沖系統(tǒng)緩沖力不足；

4.培養(yǎng)液中鹽濃度不正確；

5.細菌、酵母或真菌污染。

解決方法：

1.按培養(yǎng)液中NaHCO3濃度增加或減少培養(yǎng)箱內(nèi)CO2濃度，2.0g/L到3.7g/L濃度NaHCO3對應(yīng)CO2濃度為5％到10％或者改用不依賴CO2培養(yǎng)液

2.松開瓶蓋1/4圈

3.加HEPES緩沖液至10到25mM終濃度

4.在CO2培養(yǎng)環(huán)境中改用基于Hank’s鹽配制的培養(yǎng)液，在大氣培養(yǎng)環(huán)境中培養(yǎng)改用Hank’s鹽配制的培養(yǎng)液

5.丟棄培養(yǎng)物或用抗生素除菌

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